乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus，HBV）感染是世界最常见的慢性病毒感染，每年约有82万人死于HBV相关肝硬化和/或HBV相关肝细胞癌^[1]。中国是一个受灾严重的国家，HBV携带者约占中国总人口的6%。

目前，乙型肝炎的诊断主要基于HBV-DNA核酸检测、HBV血清学检测、血清生物化学检测即包括AST、ALT，总胆红素和血清白蛋白等相关指标检测^[2]，血清HBV-DNA和ALT作为常规的临床指标用以评估慢性乙型肝炎，同时其数值的增高也是抗病毒治疗的关键参考物。

HBV-DNA核酸检测在慢性HBV感染者的全程管理中，占据着重要的地位。高灵敏HBV-DNA定量核酸检测其灵敏度和准确性更高，不仅可以为临床医师在诊疗过程中提供更准确的检测指标，还能更优的对低载量病毒患者进行监测。

在2022年版中华医学会肝病学分会发布的《慢性乙型肝炎防治指南》中明确指出：对HBsAg阳性者，包括正在接受抗病毒治疗的CHB患者，应尽可能采用高灵敏且检测线性范围大的HBV-DNA核酸检测方法（定量下限为10-20IU/mL）^[2]。

一、什么是高灵敏HBV-DNA检测？

高灵敏HBV-DNA定量检测顾名思义，就是较普通HBV-DNA检测更灵敏更准确地发现HBV病毒。在临床检测中，HBV-DNA定量检测采用实时定量聚合酶链反应法（Polymerase chain reaction，PCR），仪器检测的检出限一般为100~500 IU/mL。

由于不同厂家研发的检测试剂的灵敏度不同，高灵敏HBV-DNA核酸检测试剂较普通HBV-DNA定量检测下限更低，达10~20 IU/mL甚至更低水平。特异性好、灵敏度高、准确率高、重复性好是高灵敏HBV-DNA核酸检测的最大优势。

在病毒载量较低情况下采用普通HBV-DNA来进行检测，容易产生假阴性的结果，易造成患者误诊漏诊，从而影响医生对病情的判断及诊疗。所以针对低水平HBV-DAN复制的监测，需要高灵敏HBV-DNA定量核酸检测指标来更灵敏、准确、稳定的反应患者真实的乙型肝炎病毒核酸水平。

二、高灵敏HBV-DNA检测的临床意义

1.提供准确的病毒学信息，筛查抗病毒治疗对象，精确判断抗病毒治疗启动时机，及时启动抗病毒治疗。

高灵敏HBV-DNA定量检测是国际公认乙肝病毒指标检测的“金标准”。在2020年亚洲地区发布的优化乙型肝炎病毒诊断和启动抗病毒治疗的专家共识^[3]、欧洲肝脏研究协会和美国肝病协会相关指南^[4-5]中都推荐采用高灵敏HBV-DNA检测方法进行相关病毒学检测。

高灵敏HBV-DNA定量检测可以准确发现低病毒血症的患者，扩大抗病毒治疗筛选对象，剔除普通HBV-DNA核酸检测因灵敏度的限制、检测阈值高而造成的假阴性结果，指导临床对患者尽早启动抗病毒治疗方案，最大限度的消除乙肝患者。

2.准确监测应答、及时预测耐药出现、合理判断治疗终点。

多项研究证实，高敏HBV-DNA检测对于精准把握乙型肝炎抗病毒治疗疗效、准确判断患者预后，具有重要价值。在乙型肝炎感染早期，无症状、体征的肝纤维化和早期肝硬化患者其常规生化指标可能无明显异常，需要通过肝脏组织病理学结果来反映肝脏真实受损情况。

在对患者的诊疗过程中，临床可以通过高灵敏HBV-DNA定量检测准确监测病毒含量，个体化管理患者治疗预后。通过对不同时期的治疗监测，尽早发现病毒学突破，准确判读治疗终点。

3.更灵敏的反映机体病毒复制情况，发现隐匿性肝炎，避免漏检，区分既往感染和现症感染等。

高敏HBV-DNA检测可以及时发现隐匿性感染、免疫静默、病毒突变、窗口期等问题，避免发生交叉感染。特别对于隐匿性乙肝、低病毒血症患者病毒复制、肝炎进展监测方面，高灵敏HBV-DNA核酸检测发挥着重要的价值。为慢性乙肝患者抗病毒治疗过程中精准的病情监测提供了有力支撑。

三、如何解读高敏HBV-DNA报告单？

高敏HBV-DNA报告单呈现在患者手上的分为阴性结果和阳性结果。

1. 阴性结果：未检测到靶基因，该检测的标本中未检测到HBV-DNA核酸。

2. 阳性结果。阳性结果分为2种情况：

第一种：10~20 IU/mL,标本中检测到HBV-DNA,但未在线性范围，不能准确定量。

第二种：20~1×10⁹ IU/mL，标本中检测到具体数值的HBV-DNA。

在检测过程中，严格质量把控，避免人为误差。临床会根据不同的数值采用不同的治疗方案，规范诊疗患者。

四、实验室在高敏HBV-DNA检测方面的注意事项有哪些？

高敏乙肝核酸检测适用的标本类型为血清或者血浆。在实验室操作时，要严格按照PCR基因扩增实验室的管理规范、该项目的SOP操作规程进行实验，并做好质量控制。试剂盒中的组分需在有效期内使用，避免反复冻融。实验过程中所用的耗材，需使用无DNA酶、RNA酶的离心管和吸头或经过高压每月的一次性离心管和吸头。重视生物安全，样本的操作和处理均需符合相关法规：卫生部《病原微生物实验室生物安全通用准则》和《医疗废物管理条例》。

高敏HBV DNA定量检测能准确反映患者体内HBV的复制情况和传染性，适于发现隐匿性感染，低病毒载量乙肝患者的治疗监测。对慢性乙型肝炎患者的诊断、治疗及预后，发挥着重要的作用。

参考文献

[1]WHO.Global Progress Report on HIV, Viral Hepatitis and Sexually Transmitted Infections, 2021 (2021). Available at: https://www.who.int/publications/i/item/9789240027077.

[2]中华医学会肝病学分会，中华医学会感染病分会.慢性乙型肝炎防治指南（2022年版）[J].中华临床感染病杂志，2022，15(6)，401-427.

[3] Gane EJ, Charlton MR, Mohamed R, et al. Asian consensus recommendations on optimizing the diagnosis and initiation of treatment of hepatitis B virus infection in resource-limited settings[J]. J Viral Hepat, 2020, 27(5): 466-475. DOI: 10.1111/ jvh. 13244.

[4]European Association for the Study of the Liver. Electronic address eee, European Association for the Study of the L: EASL 2017 Clinical Practice Guidelines on the management of hepatitis B virus infection. J Hepatol 2017, 67(2):370-398.

[5]Terrault NA, Lok ASF, McMahon BJ,et al: Update on prevention, diagnosis, and treatment of chronic hepatitis B: AASLD 2018 hepatitis B guidance. Hepatology 2018, 67(4):1560-1599.